إرشادات معملية للكشف عن عدوى فيروس جدري القرود
أعلن المدير العام لمنظمة الصحة العالمية (WHO) أن تفشي مرض جدري القرود المتصاعد في العالم يمثل حالة طوارئ صحية عامة ذات أهمية دولية (PHEIC) في 23 يوليو 2022. وفقًا لمنظمة الصحة العالمية ، هناك أكثر من 35000 حالة في 92 دولة / إقليم ، و 12 الوفيات اعتبارًا من 17 أغسطس. معظم الحالات المبلغ عنها (التي لها تاريخ سفر) سافرت إلى مناطق في أوروبا وأمريكا الشمالية.
يعد جدري القرود مرضًا نادرًا ناجمًا عن الإصابة بفيروس جدري القرود (MPXV) - وهو فيروس DNA مزدوج الشريطة مغلف وينتمي إلى نفس عائلة الفيروسات التي تسبب الجدري. يمكن أن ينتقل هذا الفيروس عن طريق ملامسة سوائل الجسم أو الآفات على الجلد أو الأسطح المخاطية الداخلية مع أعراض مثل الحمى والصداع وآلام العضلات. عادة ما تتراوح فترة حضانة جدري القرود من 6 إلى 13 يومًا ولكن يمكن أن تتراوح من 5 إلى 21 يومًا (حوالي ثلاثة أسابيع).
وفقًا لمنظمة الصحة العالمية ، فإن أفضل العينات التشخيصية تأتي مباشرة من الطفح الجلدي - الجلد أو السوائل أو القشور أو الخزعة حيثما كان ذلك ممكنًا. قد لا تكون الطرق الأخرى مثل اكتشاف المستضد والأجسام المضادة مفيدة لأنها لا تميز بين فيروسات الأورثوبوكس.
يوصى باتباع نهج قائم على المخاطر في معالجة العينات المأخوذة من الحالات المشتبه فيها أو المحتملة أو المؤكدة لجدري القرود في المختبر. لذلك ، يجب تنفيذ إجراءات الكشف عن وجود MPXV ، المصنف على أنه عامل ممرض من مجموعة المخاطر 3 ، في مختبر المستوى 2 من السلامة الأحيائية باستخدام قائمة المعدات الموضحة أدناه.
دليل المعدات لاكتشاف فيروس جدري القرود
تخزين العينة والكاشف
يوصى باستخدام عينات MPXV للتبريد عند 2 درجة مئوية إلى 8 درجات مئوية أو يجب تجميدها (-20 درجة مئوية أو أقل) خلال ساعة من التجميع. إذا تجاوز وقت النقل سبعة أيام ، يجب تخزين العينات في درجة حرارة -20 درجة مئوية أو أقل. وفي الوقت نفسه ، ينصح -70 درجة مئوية لتخزين العينات على المدى الطويل (>60 يومًا من الاستلام).
تم تجهيز ثلاجات مختبر Biobase والمجمدات المعملية ومجمدات درجة الحرارة المنخفضة للغاية بأنظمة تبريد جيدة التصميم ومواد عالية الجودة مناسبة لتخزين العينات البيولوجية الحساسة لدرجة الحرارة والتي تتطلب ظروف تخزين حرجة.
التعامل مع العينة وتحضيرها
يمكن أن ينتقل MPXV أثناء مرحلة معالجة العينة بسبب المواد الملوثة أو الطرق غير المناسبة. نتيجة لذلك ، يجب مراعاة تدابير السلامة الأحيائية المتزايدة. قبل تعطيل العينة ، يجب تحضير عينات من المرضى المشتبه في إصابتهم بـ MPXV في خزانة وظيفية للسلامة الأحيائية من الفئة الثانية ؛ ومع ذلك ، هذا ليس مطلوبًا للعينات المعطلة بشكل صحيح.
بصرف النظر عن الحماية التي توفرها خزانات السلامة الحيوية ، فإن خزانات السلامة البيولوجية من الفئة الثانية Biobase متوافقة مع NSF 49 و EN 12469 مع ميزات سهلة الاستخدام ومغلفة بمسحوق مضاد للميكروبات على جميع الأسطح المطلية الخارجية والداخلية لتحسين السلامة. تعتبر أجهزة الطرد المركزي ضرورية لفصل المكونات السائلة والصلبة للعينة. ينصح باستخدام أكواب الأمان أو الدوارات محكمة الغلق إذا كانت ضرورية للإجراء.
الكشف والتحليل
يتم إجراء اختبار تضخيم الحمض النووي (NAAT) لتأكيد الإصابة بـ MPXV. لاكتشاف تسلسل الحمض النووي الفيروسي الفريد ، يتم استخدام تفاعل تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الفعلي أو تفاعل البوليميراز التقليدي (PCR). هناك نوعان من الخطوات المتضمنة في الكشف عن الفيروسات. يكتشف PCR الأول فيروسات أورثوبوكس ولكنه لا يحدد الأنواع بينما يكتشف PCR الثاني (أو التسلسل) MPXV على وجه التحديد.
يوفر جهاز التدوير الحراري PCR في الوقت الحقيقي تضخيمًا فعالًا للأحماض النووية لتحليل الفيروسات. تقدم Biobase أجهزة Swift ™ PCR الحرارية Cyclers الجديدة مع جهاز كمبيوتر مدمج للتشغيل المستقل من إدخال برنامج PCR ومراقبته وتحليله.